بهداشت و بیماری‌های عفونی دام

بهداشت و بیماری‌های عفونی دام

تشخیص مولکولی بورخولدریا مالئی در خون اسب به روش واکنش زنجیره‌ای پلی مراز در شهرستان اشنویه

نوع مقاله : مقاله پژوهشی

نویسندگان
احمد حاجی زاده
امیر توکمه چی
گروه میکروبیولوژی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه ارومیه، آذربایجان غربی، ایران.
10.22034/jahid.2024.713560
چکیده
زمینه و هدف: بیماری مشمشه از مهمترین بیماریهای مشترک بین انسان و دام است. عامل این بیماری باکتری گرم منفی به نام بورخولدریامالئی است. این باکتری از قدیمی ترین باکتریهای شناخته شده بهوسیلۀ انسان است. این مطالعه با هدف جستوجوی ژنومی باکتری بورخولدریا مالئی از نمونه های خون اسبان منطقه اشنویه آذربایجان غربی در سال 1399 انجام شده است.
مواد و روشها: در این مطالعه به صورت تصادفی تعداد 384 نمونه خون از اسبان منطقه جمع آوری شد. در مرحلۀ بعد به منظور بررسی مولکولی از تمامی نمونه ها با کیت استخراج DNA( Taiwan ,Favorgen )استخراج شد. همچنین برای تشخیص مولکولی از روش واکنش زنجیرهای پلیمراز آشیانهای استفاده شد. پرایمرهای استفادهشده در این مطالعه براساس ژنهای Flip و 5AT با نرمافزار AmplifiX طراحی شدند.
یافته ها: نتایج نشان داد که از 384 نمونه خون بررسیشده با روش واکنش زنجیرهای پلیمراز آشیانهای، 35 نمونه (9/1) ازنظر وجود ژنوم بورخولدریا مالئی با پرایمرهای ژن 5AT مثبت بود. اما هیچکدام از نمونه های حتی تک نمونۀ مثبت با پرایمرهای 5AT با پرایمرهای Flip مثبت نشدند.
نتیجه گیری: با توجه به اینکه باکتری بورخولدریا مالئی یک باکتری بدون حرکت )بدون تاژک( است. منفی بودن نتایج PCR براساس پرایمرهای )Flip تاژکی( منطقی است. هرچند میزان آلودگی در نمونه های بررسی شده پایین بود، اما با توجه به اهمیت بیماری مشمشه و زئونوز بودن آن بهتر است موارد تکگیر را هم به نهادهای بهداشتی و مراقبتی گزارش داد.
کلیدواژه‌ها
اسب
بورخولدریا مالئی
خون
واکنش زنجیره‌ای پلی مراز
موضوعات

عنوان مقاله English

Molecular detection of Burkholderia mallei in horse blood by polymerase chain reaction method in Oshnaviyeh city

نویسندگان English

Ahmad Haji Zadeh
Amir Tukmechi
Department of Microbiology, Faculty of Veterinary Medicine, Urmia University, Daneshgah Blvd, Urmia, West Azerbaijan, Iran
چکیده English

Background and Aim:. Glanders disease (Burkholderia mallei) is one of the most important common diseases of humans and animals. B. mallei is one of the oldest gram-negative bacteria known to man. This study was conducted with the aim of searching the genome of B. mallei bacteria from horse blood.
Materials and Methods: Samples (n=384) were randomly collected from horses of Oshnaveh (West Azerbaijan, Iran) region in 2020. All samples were extracted with DNA extraction kit (Favorgen, Taiwan) for molecular analysis. Primers designed, based on Flip and AT5 genes with AmplifiX software and PCR method was used for molecular diagnosis.
Results: Results showed that 9.1% (35 of 384 blood samples) was positive for the presence of B. mallei genome with AT5 gene primers. However, none of the samples, even a single positive sample with AT5 primers, were positive with Flip primers. Considering that B. mallei are a non-motility bacterium (without flagella), negativity of PCR results based on flagellum flip primers is reasonable.
Conclusion: According to the results of this research, the percentage of infection was low, but considering the importance of
the disease and its zoonosis, it is better to report isolated cases to the health and care institutions.

کلیدواژه‌ها English

Horse
Burkholderia mallei
Blood
PCR
 
1. Yabuuchi E, Kosako Y, Oyaizu H, Yano I, Hotta H, Hashimoto Y, et al. Proposal of Burkholderia gen. nov. and transfer of seven species of the genus Pseudomonas homology group II to the new genus, with the type species Burkholderia cepacia (Palleroni and Holmes 1981) comb. nov. Microbiology and immunology. 1992;36(12):1251-75.
2. Currie BJ. Melioidosis: an important cause of pneumonia in residents of and travellers returned from endemic regions. European Respiratory Journal. 2003;22(3):542-50.
3. Hornstra H, Pearson T, Georgia S, Liguori A, Dale J, Price E, et al. Molecular epidemiology of glanders, Pakistan. Emerging infectious diseases. 2009;15(12):2036.
4. Al-Ani FK, Al-Rawashdeh OF, Ali AH, Hassan FK. Glanders in horses: clinical, biochemical and serological studies in Iraq. Veterinarski Arhiv. 1998;68(5):155-62.
5. Arefnejad M, Tajzadeh P, Barjesteh A. A history of Burkholderia-caused infections in Iran. Journal of Paramedical Sciences & Rehabilitation. 2013;2(2):54-9.
6. McMenamin JD, Zaccone TM, Coenye T, Vandamme P, LiPuma JJ. Misidentification of Burkholderia cepacia in US cystic fibrosis treatment centers. Chest. 2000;117(6):1661-5.
7. Malik P, Singha H, Goyal SK, Khurana SK, Tripathi BN, Dutt A, et al. Incidence of Burkholderia mallei infection among indigenous equines in India. Veterinary Record Open. 2015;2(2):e000129.
8. Mardani M, Kamali M. Review of glanders disease threat again. Journal of Shahid Beheshti University of Medical Sciences. 2011;35:174-81.
9. Tizfahm Tikmehdash H, Dehnad AR, Mosvari N, Mahmazi S. Glanders re-emerging in few horses in East-Azerbaijan, Iran. Journal of Zoonotic Diseases. 2022;6(2).
10. Abreu DC, Gomes AS, Tessler DK, Chiebao DP, Del Fava C, Romaldini AHdCN, et al. Systematic monitoring of glanders-infected horses by complement fixation test, bacterial isolation, and PCR. Veterinary and animal science. 2020;10:100147.
11. Tadjbakhsh H. Traditional methods used for controlling animal diseases in Iran. Revue scientifique et technique (International Office of Epizootics). 1994;13(2):599-614.
12. Yazdansetad S, Mosavari N, Tadayon K, Mehregan I. Detection And Molecular Identification Of Burkholderia mallei Isolated From Blood Specimen Of An Infected Horse With Glanders. Veterinary Researches & Biological Products. 2019; 32(2):2-10.
13. Dashtipour S, Tadayon K, Yazdansetad S, Mosavari N, Keshavarz R. Genomic pattern analysis of Burkholderia mallei field isolates by pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) discriminatory typing. Iranian Journal of Microbiology. 2021;13(5):574.
14. Ulrich RL, Ulrich MP, Schell MA, Kim HS, DeShazer D. Development of a polymerase chain reaction assay for the specific identification of Burkholderia mallei and differentiation from Burkholderia pseudomallei and other closely related Burkholderiaceae. Diagnostic microbiology and infectious disease. 2006;55(1):37-45.
15. Bauernfeind A, Roller C, Meyer D, Jungwirth R, Schneider I. Molecular Procedure for Rapid Detection ofBurkholderia mallei and Burkholderia pseudomallei. Journal of clinical microbiology. 1998;36(9):2737-41.
16. Scholz HC, Joseph M, Tomaso H, Al Dahouk S, Witte A, Kinne J, et al. Detection of the reemerging agent Burkholderia mallei in a recent outbreak of glanders in the United Arab Emirates by a newly developed fliP-based polymerase chain reaction assay. Diagnostic microbiology and infectious disease. 2006;54(4):241-7.
17. KR P, MA V. First glanders cases detected in Nepal underscore the need for surveillance and border controls. BMC Veterinary Research. 2022;18(1):1-6.
18. Erdemsurakh O, Ochirbat K, Gombosuren U, Tserendorj B, Purevdorj B, Vanaabaatar B, et al. Seroprevalence of equine glanders in horses in the central and eastern parts of Mongolia. Journal of Veterinary Medical Science. 2020:20-0219.
19. Ramachandran S. Molecular Typing of Burkholderia mallei Isolates from Equids with Glanders, India.
20. Brangsch H, Saqib M, Sial AuR, Melzer F, Linde J, Elschner MC. Sequencing-Based Genotyping of Pakistani Burkholderia mallei Strains: A Useful Way for Investigating Glanders Outbreaks. Pathogens. 2022;11(6):614.